移液器的檢測和操作過程
一、實(shí)驗(yàn)室簡單檢測
氣密性檢測:
移液器吸滿液體后,手持垂直放置15s,檢查吸嘴的尖頭有無液滴,如有,則說明漏氣。
準(zhǔn)確性檢測:
量程小于1μl,建議使用分光光度法檢測。將移液器調(diào)至目標(biāo)體積,然后移取染料溶液,加入一定體積的蒸餾水中,測定溶液的稀釋度(334nm或340nm),重復(fù)幾次移液操作,計(jì)算移液器的度。
量程大于1μl,可以用稱重法檢測。通過對水的稱重,轉(zhuǎn)換成體積(體積=質(zhì)量/密度),鑒別移液器的準(zhǔn)確性。由于水的密度是隨著溫度變化而變化,且稱量天平本身度不符合檢測要求,檢測又大多在一個(gè)開放式空間內(nèi)操作,偏差在所難免。因而,此種稱量法只能現(xiàn)場粗略地判斷移液器的準(zhǔn)確性,進(jìn)一步的校準(zhǔn)必須在專業(yè)的實(shí)驗(yàn)室操作進(jìn)行。 注意:稱重法實(shí)驗(yàn)室*條件是高度靈敏的分析天平(定期校準(zhǔn))、雙蒸水和稱量容器。水、移液器和吸嘴必須具有相同的溫度(20℃時(shí)水的密度為0.09982)。
二、移液器操作過程
1) 同溫化處理:校正前,所有移液器及校正介質(zhì)(如工作臺(tái)、天平、雙蒸水等)置于相同操作間至少4h,以確保它們具有相同的溫度。
2) 內(nèi)外部清洗。
3) 潤滑活塞。
4) 校準(zhǔn):采用三點(diǎn)校準(zhǔn)法,即根據(jù)移液器量程范圍,選取zui低量程、中間值和zui高量程三點(diǎn)分別測試10次,各個(gè)測試點(diǎn)取其平均值,計(jì)算其準(zhǔn)確度(inaccuracy)和度(imprecision),評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)符合DIN 12650要求。
5) 校準(zhǔn)報(bào)告:可根據(jù)客戶需求提供給算計(jì)打印的標(biāo)準(zhǔn)報(bào)告或PICASO校正報(bào)告,符合ISO、DIN或ASTM相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)。
三、影響準(zhǔn)確性的因素
1) 操作錯(cuò)誤:包括30℃手持式移液器吸液;與吸嘴不匹配,較易造成脫落;殘留的試劑倒流,污染活塞和密封圈;快速吸液排液,導(dǎo)致部分液體殘留在吸頭上等都會(huì)影響準(zhǔn)確性。
2) 移液器損壞:包括移液器的頭部被刮擦,斷裂受損;活塞受污染;彈簧受腐蝕等。
3) 操作條件的影響:包括未作調(diào)整吸取與水不同密度的液體;樣品和移液器的差別太大等。